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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Human HIF-1α(Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | Q16665 | 别称 | HIF1A, HIF-1A, MOP1, PASD8, bHLHe78, basic helix-loop-helix transcription factor |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 37.5 pg/mL |
| 标准品 | 4000pg/mL | 检测范围 | 62.5-4000pg/mL |
| 样品类型 | Tissue homogenate, Cell lysate；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人HIF-1α抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人HIF-1α会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人HIF-1α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人HIF-1α抗体与结合在包被抗体上的人HIF-1α结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人HIF-1α浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人HIF-1α的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 4000.00 | 2.364 | 2.334 |
| 2000.00 | 1.524 | 1.494 |
| 1000.00 | 0.850 | 0.820 |
| 500.00 | 0.450 | 0.420 |
| 250.00 | 0.230 | 0.200 |
| 125.00 | 0.127 | 0.097 |
| 62.50 | 0.080 | 0.050 |
| 0.00 | 0.030 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 77.02 | 674.36 | 1027.58 | 111.43 | 776.23 | 1368.87 |
| Standard deviation | 5.28 | 26.37 | 99.71 | 4.53 | 34.37 | 53.09 |
| C V (%) | 6.45 | 4.76 | 4.11 | 5.81 | 3.13 | 6.45 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 85-99 | 92 |
| EDTA plasma (n=8) | 83-95 | 89 |
| Cell culture media (n=8) | 96-107 | 102 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 86-94 | 82-95 | 96-102 |
| Average (%) | 92 | 93 | 96 | |
| 1:4 | Range (%) | 91-105 | 82-95 | 83-97 |
| Average (%) | 102 | 91 | 88 | |
| 1:8 | Range (%) | 87-99 | 83-96 | 84-99 |
| Average (%) | 91 | 91 | 91 | |
| 1:16 | Range (%) | 95-100 | 88-95 | 95-102 |
| Average (%) | 96 | 95 | 101 |
检测流程/ Assay Procedures
