技术专栏

1. 为什么ELISA检测组织匀浆上清以及细胞提取液需要BCA总蛋白定量？ 答：① 减少误差：组织匀浆以及细胞提取液处理过程中的样本量和蛋白提取效率可能存在误差，BCA定量能确保样品中总蛋白浓度一致，从而提高ELISA结果的准确性；② 提高实验可靠性：BCA定量确保每个样品中总蛋白量相同，使得ELISA结果具有可比性和可靠性；③ 期刊要求：高水平期刊通常要求在实验中报告蛋白定量数据，以确保结果的科学性和重复性。因此，建议在进行ELISA实验时，先进行BCA总蛋白定量实验。 2. 检测组织匀浆上清以及细胞提取液时，是否需要将组织匀浆上清以及细胞提取液稀释到相同的浓度(ug/ul)再上

样本稀释方案  如果您的检测样本需要稀释且稀释倍数高，建议通用稀释方案参考如下： 稀释100倍：一步稀释。取5μL 样本到 495μL 标准品&样本稀释液内，做100倍稀释； 稀释1000倍：两步稀释。取5μL样本到95μL标准品&样本稀释液内，做20倍稀释，再取5μL20倍稀释样本到245μL标准品&样本稀释液内， 做50倍稀释，总共稀释1000倍； 稀释100,000 倍：三步稀释。取5μL 样本到195μL标准品&样本稀释 液内，做40倍稀释，再取5μL40倍稀释

1. 特殊情况下的样本的处理 关于高脂样本：高脂样本含有脂肪，不是均质溶液，若直接上样会影响抗原抗体的结合，测值不准确。建议先大转速5000×g离心，静置10min后取中层较澄清液体，再用大转速(≥5000×g)离心一次取中下层清液用于检测。   关于溶血样本：样本溶血后，内源性HRP酶以及血红蛋白的类HRP性能会导致ELISA出现不可控的非特异性着色，从而影响检测结果的准确性。如果样本轻微溶血，在浓度范围允许的情况下，可以对样本进行稀释检测以减少其影响或者是进行离心取上清。如果溶血严重建议重新收集样本。   2. 需要破碎的样本处理方式 细胞提取液：：贴壁