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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Mouse BAFF/CD257(B-cell Activating Factor) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
| Uniprot ID | Q9WU72 | 别称 | TNFSF13B, BLYS, TALL1, THANK, TNFSF2, ZTNF4 |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 37.5 pg/mL |
| 标准品 | 4000pg/mL | 检测范围 | 62.5-4000pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Endocrinology;Reproductive science;Hormone metabolism; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠 BAFF/CD257抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠 BAFF/CD257会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠 BAFF/CD257抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠 BAFF/CD257抗体与结合在包被抗体上的小鼠 BAFF/CD257结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，小鼠 BAFF/CD257浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 BAFF/CD257的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 4000.00 | 2.384 | 2.334 |
| 2000.00 | 1.544 | 1.494 |
| 1000.00 | 0.870 | 0.820 |
| 500.00 | 0.470 | 0.420 |
| 250.00 | 0.250 | 0.200 |
| 125.00 | 0.147 | 0.097 |
| 62.50 | 0.100 | 0.050 |
| 0.00 | 0.050 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 64.44 | 595.15 | 1707.08 | 115.92 | 762.24 | 1353.71 |
| Standard deviation | 5.48 | 49.07 | 50.93 | 5.87 | 30.14 | 78.42 |
| C V (%) | 7.45 | 5.24 | 6.97 | 3.46 | 6.75 | 6.40 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 94-107 | 100 |
| EDTA plasma (n=8) | 87-95 | 91 |
| Cell culture media (n=8) | 82-95 | 88 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 87-98 | 89-97 | 86-97 |
| Average (%) | 90 | 94 | 95 | |
| 1:4 | Range (%) | 92-104 | 85-94 | 83-96 |
| Average (%) | 104 | 89 | 89 | |
| 1:8 | Range (%) | 82-96 | 80-96 | 91-103 |
| Average (%) | 92 | 85 | 92 | |
| 1:16 | Range (%) | 95-102 | 85-99 | 96-105 |
| Average (%) | 101 | 94 | 102 |