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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Mouse NGF(Nervegrowth factor) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
| Uniprot ID | P01139 | 别称 | Beta-NGF, HSAN5, NGFB, NGF-B |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 18.75 pg/mL |
| 标准品 | 2000pg/mL | 检测范围 | 31.25-2000pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Cell Biology; Neuroscience; Signal Transduction; Developmental Biology |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠NGF抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠NGF会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠NGF抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠NGF抗体与结合在包被抗体上的小鼠NGF结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，小鼠NGF浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠NGF的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 2000.00 | 2.323 | 2.284 |
| 1000.00 | 1.529 | 1.490 |
| 500.00 | 0.898 | 0.859 |
| 250.00 | 0.415 | 0.376 |
| 125.00 | 0.236 | 0.197 |
| 62.50 | 0.136 | 0.097 |
| 31.25 | 0.089 | 0.050 |
| 0.00 | 0.039 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 51.74 | 434.48 | 540.64 | 50.82 | 437.52 | 622.45 |
| Standard deviation | 2.58 | 17.99 | 37.01 | 2.77 | 18.54 | 42.03 |
| C V (%) | 4.81 | 5.97 | 2.76 | 4.03 | 6.16 | 4.05 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 82-95 | 88 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-94 | 87 |
| Cell culture media (n=8) | 95-107 | 101 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 95-106 | 95-103 | 89-97 |
| Average (%) | 105 | 99 | 93 | |
| 1:4 | Range (%) | 88-103 | 80-96 | 85-92 |
| Average (%) | 94 | 83 | 91 | |
| 1:8 | Range (%) | 81-98 | 87-98 | 95-103 |
| Average (%) | 89 | 93 | 101 | |
| 1:16 | Range (%) | 93-102 | 85-92 | 87-93 |
| Average (%) | 100 | 89 | 88 |
检测流程/ Assay Procedures
