产品名称 | Mouse D-LDH(D-LactateDehydrogenase) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | N/A | 别称 | DLD, LDHD, Probable D-lactate dehydrogenase,mitochondrial, |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 2.81 mIU/mL |
标准品 | 300mIU/mL | 检测范围 | 4.69-300mIU/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Enzyme & Kinase;Infection immunity; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠D-LDH抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠D-LDH会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠D-LDH抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠D-LDH抗体与结合在包被抗体上的小鼠D-LDH结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠D-LDH浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠D-LDH的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(mIU/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
300.00 | 2.380 | 2.338 |
150.00 | 1.594 | 1.552 |
75.00 | 0.889 | 0.847 |
37.50 | 0.389 | 0.347 |
18.75 | 0.234 | 0.192 |
9.38 | 0.125 | 0.083 |
4.69 | 0.088 | 0.046 |
0.00 | 0.042 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(mIU/mL) | 6.59 | 52.90 | 99.48 | 5.41 | 70.87 | 98.31 |
Standard deviation | 0.32 | 2.30 | 6.67 | 0.39 | 2.88 | 3.93 |
C V (%) | 4.38 | 2.88 | 3.88 | 6.94 | 5.90 | 4.17 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-94 | 87 |
EDTA plasma (n=8) | 89-101 | 95 |
Cell culture media (n=8) | 82-95 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 80-92 | 82-94 | 88-95 |
Average (%) | 84 | 89 | 88 | |
1:4 | Range (%) | 80-93 | 82-94 | 98-107 |
Average (%) | 91 | 90 | 102 | |
1:8 | Range (%) | 91-98 | 95-102 | 90-99 |
Average (%) | 95 | 100 | 98 | |
1:16 | Range (%) | 89-102 | 87-103 | 88-97 |
Average (%) | 90 | 89 | 89 |