产品名称 | Human OXA(Orexin A) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | O43612(34~66aa) | 别称 | Hypocretin-1, Orexin A, HCRT1, Hcrt ; Hcrt1 ; Hypocretin ; Hypocretin neuropeptide precursor ; Hypocretin-1 ; OREX ; Orexin precursor ; OX ; PPOX |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 37.5 pg/mL |
标准品 | 4000pg/mL | 检测范围 | 62.5-4000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Infection immunity; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人OXA抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人OXA与包被的人OXA竞争生物素标记的抗人OXA单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人OXA浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人OXA的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
4000.00 | 0.244 |
2000.00 | 0.407 |
1000.00 | 0.647 |
500.00 | 0.964 |
250.00 | 1.257 |
125.00 | 1.577 |
62.50 | 1.847 |
0.00 | 2.669 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 155.95 | 943.370 | 1861.580 | 173.48 | 791.82 | 1986.240 |
Standard deviation | 11.50 | 47.81 | 94.04 | 8.97 | 29.91 | 105.21 |
C V (%) | 3.81 | 5.85 | 6.48 | 5.82 | 6.16 | 7.16 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-92 | 85 |
EDTA plasma (n=8) | 92-105 | 98 |
Cell culture media (n=8) | 85-97 | 91 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-105 | 86-94 | 85-95 |
Average (%) | 102 | 92 | 87 | |
1:4 | Range (%) | 87-98 | 86-94 | 89-97 |
Average (%) | 94 | 90 | 94 | |
1:8 | Range (%) | 91-102 | 85-95 | 85-94 |
Average (%) | 94 | 86 | 91 | |
1:16 | Range (%) | 86-102 | 89-99 | 80-96 |
Average (%) | 92 | 96 | 80 |