产品名称 | Human AP36(Apelin 36) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | Q9ULZ1(42~77aa) | 别称 | AP36 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 28.13 pg/mL |
标准品 | 3000pg/mL | 检测范围 | 46.88-3000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway;Nutrition metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人AP36抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人AP36与包被的人AP36竞争生物素标记的抗人AP36单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人AP36浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人AP36的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
3000.00 | 0.243 |
1500.00 | 0.365 |
750.00 | 0.543 |
375.00 | 0.827 |
187.50 | 1.136 |
93.75 | 1.504 |
46.88 | 1.777 |
0.00 | 2.525 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 17.65 | 659.05 | 811.64 | 119.45 | 614.53 | 1443.15 |
Standard deviation | 1.68 | 32.33 | 67.14 | 2.11 | 22.85 | 59.69 |
C V (%) | 5.88 | 2.77 | 5.06 | 6.34 | 4.42 | 6.75 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 82-95 | 88 |
EDTA plasma (n=8) | 80-95 | 87 |
Cell culture media (n=8) | 86-99 | 92 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 93-101 | 93-102 | 82-95 |
Average (%) | 100 | 94 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 97-103 | 93-102 | 89-101 |
Average (%) | 98 | 98 | 99 | |
1:8 | Range (%) | 91-99 | 81-96 | 87-98 |
Average (%) | 91 | 91 | 91 | |
1:16 | Range (%) | 90-98 | 93-106 | 92-104 |
Average (%) | 94 | 98 | 97 |