产品名称 | Human SAA(Serum Amyloid A) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P0DJI8 | 别称 | SAA1, PIG4, SAA, TP53I4, Serum amyloid A1 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.23 ng/mL |
标准品 | 25ng/mL | 检测范围 | 0.39-25 ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids,Sample Volume= 100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Cardiovascular, Signaling transduction, Cancer, Immunology, Metabolism, Stem Cells |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 SAA抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人 SAA会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人 SAA抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人 SAA抗体与结合在包被抗体上的人 SAA结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人 SAA浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人 SAA的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
25.00 | 2.261 | 2.209 |
12.50 | 1.600 | 1.548 |
6.25 | 1.045 | 0.993 |
3.13 | 0.587 | 0.535 |
1.56 | 0.272 | 0.220 |
0.78 | 0.132 | 0.081 |
0.39 | 0.095 | 0.044 |
0.00 | 0.051 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 2.19 | 15.71 | 26.19 | 1.44 | 11.89 | 30.28 |
Standard deviation | 0.09 | 0.72 | 1.02 | 0.10 | 0.58 | 1.88 |
C V (%) | 7.41 | 3.60 | 2.58 | 4.17 | 3.36 | 4.86 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-97 | 90 |
EDTA plasma (n=8) | 88-102 | 95 |
Cell culture media (n=8) | 80-93 | 86 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 90-99 | 88-103 | 85-97 |
Average (%) | 97 | 96 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 95-106 | 83-94 | 87-96 |
Average (%) | 95 | 90 | 94 | |
1:8 | Range (%) | 87-101 | 92-105 | 82-95 |
Average (%) | 92 | 95 | 95 | |
1:16 | Range (%) | 82-97 | 89-97 | 92-105 |
Average (%) | 88 | 96 | 94 |