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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Human MK(Midkine) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | P21741 | 别称 | Amphiregulin-associated protein, ARAP, MDK, MEK, Midgestation and kidney protein, midkine (neurite growth-promoting factor 2), Midkine, MK1, MKARAP, NEGF2, NEGF2FLJ27379, Neurite outgrowth-promoting factor 2, Neurite outgrowth-promoting protein |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.1 ng/mL |
| 标准品 | 10ng/mL | 检测范围 | 0.16-10ng/mL |
| 样品类型 | Tissue homogenate, Cell lysate, Cell culture supernatant；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Endocrinology;Cardiovascular biology;Hormone metabolism; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人MK抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人MK会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人MK抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人MK抗体与结合在包被抗体上的人MK结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人MK浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人MK的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 10.00 | 2.413 | 2.358 |
| 5.00 | 1.728 | 1.673 |
| 2.50 | 1.012 | 0.957 |
| 1.25 | 0.505 | 0.450 |
| 0.63 | 0.266 | 0.211 |
| 0.32 | 0.143 | 0.088 |
| 0.16 | 0.096 | 0.041 |
| 0.00 | 0.055 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 0.20 | 2.37 | 4.22 | 0.23 | 1.32 | 4.23 |
| Standard deviation | 0.01 | 0.11 | 0.22 | 0.01 | 0.07 | 0.15 |
| C V (%) | 3.04 | 6.09 | 3.69 | 4.98 | 5.87 | 3.46 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-95 | 87 |
| EDTA plasma (n=8) | 86-99 | 92 |
| Cell culture media (n=8) | 82-95 | 88 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 87-103 | 91-99 | 93-102 |
| Average (%) | 92 | 99 | 101 | |
| 1:4 | Range (%) | 97-105 | 83-89 | 81-96 |
| Average (%) | 102 | 85 | 82 | |
| 1:8 | Range (%) | 80-90 | 88-104 | 93-106 |
| Average (%) | 84 | 95 | 102 | |
| 1:16 | Range (%) | 87-96 | 97-103 | 82-95 |
| Average (%) | 91 | 102 | 92 |
检测流程/ Assay Procedures
