当前位置：
说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Human LEP(Leptin) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | P41159 | 别称 | LEPD, OBS, Obesity Homolog |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
| 标准品 | 1000pg/mL | 检测范围 | 15.63-1000pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Developmental science; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人LEP抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人LEP会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人LEP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人LEP抗体与结合在包被抗体上的人LEP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人LEP浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人LEP的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 1000.00 | 2.463 | 2.430 |
| 500.00 | 1.583 | 1.550 |
| 250.00 | 0.890 | 0.857 |
| 125.00 | 0.455 | 0.422 |
| 62.50 | 0.246 | 0.213 |
| 31.25 | 0.140 | 0.107 |
| 15.63 | 0.089 | 0.056 |
| 0.00 | 0.033 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 22.47 | 203.43 | 358.61 | 24.15 | 129.84 | 398.31 |
| Standard deviation | 0.89 | 10.63 | 22.88 | 1.18 | 10.86 | 22.67 |
| C V (%) | 3.04 | 6.93 | 2.56 | 6.88 | 2.70 | 5.37 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-97 | 87 |
| EDTA plasma (n=8) | 87-99 | 93 |
| Cell culture media (n=8) | 83-97 | 90 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 86-98 | 83-94 | 86-97 |
| Average (%) | 92 | 91 | 94 | |
| 1:4 | Range (%) | 91-103 | 83-94 | 83-96 |
| Average (%) | 98 | 86 | 92 | |
| 1:8 | Range (%) | 85-97 | 85-96 | 81-94 |
| Average (%) | 88 | 94 | 84 | |
| 1:16 | Range (%) | 87-96 | 92-103 | 86-98 |
| Average (%) | 91 | 100 | 95 |
检测流程/ Assay Procedures
