当前位置：
说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Human Hepc25(Hepcidin 25) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | P81172(60~84aa) | 别称 | Hepc25, Hepcidin-25 |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.94 ng/mL |
| 标准品 | 100ng/mL | 检测范围 | 1.57-100ng/mL |
| 样品类型 | Serum；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Tumor immunity; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人Hepc25抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人Hepc25会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人Hepc25抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人Hepc25抗体与结合在包被抗体上的人Hepc25结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人Hepc25浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人Hepc25的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 100.00 | 2.362 | 2.311 |
| 50.00 | 1.560 | 1.509 |
| 25.00 | 0.957 | 0.906 |
| 12.50 | 0.525 | 0.474 |
| 6.25 | 0.270 | 0.219 |
| 3.13 | 0.155 | 0.104 |
| 1.57 | 0.094 | 0.043 |
| 0.00 | 0.051 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 2.48 | 14.21 | 46.03 | 2.30 | 20.11 | 50.24 |
| Standard deviation | 0.14 | 0.76 | 1.38 | 0.14 | 1.00 | 1.80 |
| C V (%) | 3.93 | 6.18 | 6.82 | 6.90 | 3.65 | 5.04 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 82-95 | 88 |
| EDTA plasma (n=8) | 94-107 | 100 |
| Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 87-98 | 89-99 | 96-101 |
| Average (%) | 88 | 95 | 97 | |
| 1:4 | Range (%) | 83-94 | 89-99 | 88-95 |
| Average (%) | 90 | 91 | 91 | |
| 1:8 | Range (%) | 85-98 | 83-99 | 98-107 |
| Average (%) | 97 | 98 | 102 | |
| 1:16 | Range (%) | 85-97 | 98-105 | 90-99 |
| Average (%) | 93 | 105 | 90 |
检测流程/ Assay Procedures
