产品名称 | Human GNLY(Granulysin) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P22749 | 别称 | GNLY, 519, D2S69E, LAG-2, LAG2, NKG5, TLA519, granulysin |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.14 ng/mL |
标准品 | 15ng/mL | 检测范围 | 0.24-15ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Endocrinology; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人GNLY抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人GNLY会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人GNLY抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人GNLY抗体与结合在包被抗体上的人GNLY结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人GNLY浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人GNLY的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
15.00 | 2.442 | 2.403 |
7.50 | 1.737 | 1.698 |
3.75 | 0.904 | 0.865 |
1.88 | 0.442 | 0.403 |
0.94 | 0.200 | 0.161 |
0.47 | 0.111 | 0.072 |
0.24 | 0.081 | 0.042 |
0.00 | 0.039 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 0.43 | 3.26 | 7.11 | 0.36 | 2.25 | 5.45 |
Standard deviation | 0.02 | 0.19 | 0.29 | 0.02 | 0.09 | 0.24 |
C V (%) | 5.52 | 6.18 | 3.57 | 5.74 | 4.77 | 5.26 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 92-106 | 99 |
EDTA plasma (n=8) | 90-105 | 97 |
Cell culture media (n=8) | 88-103 | 95 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-96 | 88-101 | 87-96 |
Average (%) | 91 | 96 | 88 | |
1:4 | Range (%) | 86-95 | 85-93 | 92-105 |
Average (%) | 90 | 89 | 97 | |
1:8 | Range (%) | 90-102 | 89-97 | 89-102 |
Average (%) | 93 | 94 | 93 | |
1:16 | Range (%) | 81-90 | 85-94 | 92-101 |
Average (%) | 88 | 87 | 96 |