产品名称 | Human D2D(D-Dimer) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | N/A | 别称 | D-Dimer, D dimer, D2D |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 3.75 ng/mL |
标准品 | 400ng/mL | 检测范围 | 6.25-400ng/mL |
样品类型 | Plasma;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Tumor immunity; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人D2D抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人D2D会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人D2D抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人D2D抗体与结合在包被抗体上的人D2D结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人D2D浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人D2D的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
400.00 | 2.364 | 2.334 |
200.00 | 1.524 | 1.494 |
100.00 | 0.850 | 0.820 |
50.00 | 0.450 | 0.420 |
25.00 | 0.230 | 0.200 |
12.50 | 0.127 | 0.097 |
6.25 | 0.080 | 0.050 |
0.00 | 0.030 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 11.74 | 93.65 | 133.92 | 6.87 | 90.52 | 106.71 |
Standard deviation | 0.53 | 3.54 | 9.94 | 0.63 | 4.70 | 9.26 |
C V (%) | 5.70 | 6.24 | 2.57 | 5.84 | 6.48 | 3.07 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 82-95 | 88 |
EDTA plasma (n=8) | 94-105 | 98 |
Cell culture media (n=8) | 94-107 | 100 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 80-94 | 80-92 | 85-94 |
Average (%) | 84 | 80 | 90 | |
1:4 | Range (%) | 90-99 | 96-105 | 90-99 |
Average (%) | 92 | 103 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 87-103 | 86-97 | 82-101 |
Average (%) | 91 | 95 | 82 | |
1:16 | Range (%) | 83-96 | 85-101 | 91-102 |
Average (%) | 85 | 89 | 96 |